奥林巴斯荧光显微镜与微分干涉显微镜的结合方法

2019-06-19 16:31:23 Pooher Inc. 167

为了将光漂白的影响降至最低,荧光显微镜可以与对荧光染料无破坏性的其他技术(如差分干涉对比度(DIC),霍夫曼调制对比度(HMC),透射暗场照明和相差)相结合。

奥林巴斯显微镜|奥林巴斯生物显微镜|奥林巴斯金相显微镜|奥林巴斯倒置显微镜|OLYMPUS显微镜|上海普赫光电科技有限公司

这个想法是使用无损对比增强技术在样本中找到特定的感兴趣区域,然后在不重新定位样本的情况下,将显微镜切换到荧光模式。这种类型的典型实验的结果如图1所示。图1(a)示出了使用微分干涉对比度成像的大鼠视网膜视神经节组织薄切片。图1(b)中的显微照片显示了相同的视场,但是这次使用荧光照明(汞蒸气灯和奥林巴斯WU滤光片立方体)成像,其中细胞被快速蓝染色的荧光染料染色,重氮盐特异性地染色磷脂髓鞘。图1(c)说明了两种技术结合使用,以产生叠加在视网膜的微分干涉对比图像上的荧光染色的视神经节脂质组织的美丽的显微照片。该图像用专门的萤石物镜记录,旨在允许同时观察同一目标的荧光和微分干涉对比。

奥林巴斯显微镜|奥林巴斯生物显微镜|奥林巴斯金相显微镜|奥林巴斯倒置显微镜|OLYMPUS显微镜|上海普赫光电科技有限公司

通常用于同时使用差分干涉对比度(DIC)和荧光照明对样品进行成像的显微镜配置如图2所示.DIC使用由安装在显微镜基座上的灯箱内的钨卤素灯提供的透射光进行。穿过视场光阑的光线被一面镜子反射到分镜面聚光镜中,并通过位于聚光镜前焦平面的沃拉斯顿棱镜。

由样本衍射的光首先通过位于物镜后焦平面附近的第二个Wollaston棱镜,然后在未被衍射的光通过样本的情况下干涉中间图像平面。同时,由汞燃烧器发出的紫外光通过激发滤光器,然后由分色镜从上面反射到样品上。由附着于染色样本的发色团发出的二次荧光被物镜捕获,并通过屏障过滤器进入目镜和/或光电管。这种配置可以用于单独或组合使用技术(荧光和微分干涉对比)对样品进行成像。



注意:这篇文章是由无人工介入的谷歌自动的机器翻译软件翻译完成。我们很高兴能同时提供给您由人工翻译的和由机器翻译的文章, 以使您能使用您的语言访问所有的知识库文章。然而由机器翻译的文章并不总是完美的。它可能存在词汇,语法或文法的问题,就像是一个外国人在说中文时总是可能犯这样的错误。虽然谷歌经常升级机器翻译软件以提高翻译质量,但是我们不保证机器翻译的正确度,也不对由于内容的误译或者客户对它的错误使用所引起的任何直接的, 或间接的可能的问题负责。

查看原始的英语文章:Fluorescence and DIC Combination Microscopy


邮箱咨询
QQ咨询
在线咨询
电话咨询