怎样挑选适合的显微镜及观察方式

2019-01-09 16:20:32 Pooher Inc. 304

显微镜已经成为学校、医院、研究所等机构普遍运用的科学仪器,但是对于经常使用显微镜的人士来说,如何轻松的选购一台满足自己需求并且性价比较高的显微镜是一件十分头疼的事情。

以往,许多用户在向我们咨询时候大都只能算是单纯的显微镜询价,而对显微镜的选购知识却是了解的不多,在此,普赫光电的技术工程师特意总结了一些选购生物显微镜之前一些最常见的问题,希望可以为大家的选型提供帮助。

 

生物显微镜根据结构的不同,主要可分为: 

正置显微镜、倒置显微镜、体视显微镜

1.正置显微镜——物镜在样品的上方,用来观察生物切片。

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Nikon Ci系列正置显微镜

2. 倒置显微镜——物镜在样品的下方,用来观察生物细胞、细菌以及活体组织培养。

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Nikon Ti2系列研究级倒置显微镜

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3.体视显微镜——又称为实体显微镜或解剖镜,可放置较大的样品,如植物的茎、叶、花,动物胚胎等。适宜于物体的形体检查或者对观测对象进行解剖等操作。

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Nikon SMZ18体视显微镜

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选购方法

问题一:选购之前先了解什么类型的显微镜适合您要检测的样品

做样本观察时,需借助载玻片还是培养皿?

样品放置在载玻片上观察时需选用正置生物显微镜,用培养皿时需选择倒置生物显微镜。看胚胎,植物等大样品选择体视显微镜。

问题二:是否需要对显微的镜像做拍照或进行图像分析和处理?

如果需要,请购买三目生物显微镜,另选配数码成像系统即可;如果不需要,可选择双目生物显微镜。

问题三:对显微镜的观察方式有特别的需求吗?

除了明场观察(BF)外,如果您对显微镜有荧光(FL)、相差(PH)、微分干涉DIC)、霍夫曼NAMC)、暗场(DF)、偏光(POL)其中一种或几种的需求,请注意选择带相关功能的显微镜。

问题四:您的采购预算是多少?

按观察应用,显微镜可分为普通观察、临床应用和研究级。一般来讲价格差距大,您可以根据您现有的预算来决定。


选择了合适的显微镜后,如何选择合适的观察方式,让我们的样品看起来效果更好呢?下面,我们为大家一一讲解:显微镜的七种观察方式

一.明场观察BF(Brightfield
明场观察是大家比较熟悉的一种镜检方式。

广泛应用于病理、检验,用于观察染色的或本身有颜色的切片,所有显微镜均能完成此功能。

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二.相差观察PH(Phase contrast )

活细胞和未染色的生物标本,光线通过时仅相位发生变化,这种相位差人眼无法观察。相差显微镜通过改变这种相位差,并利用光的衍射和干涉现象,把相差变为人眼可分辨的振幅差。

主要应用于:无色透明活体标本的细微结构观察,如倒置显微镜上活细胞的观察,正置显微镜上细菌的观察等。

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三:荧光观察FL(Fluorescence Microscopy)

荧光观察是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光然后观察。

主要应用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。对物质进行定性、定量分析等。

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四.微分干涉观察DIC(Differential interference contrast)

微分干涉观察出现于60年代,它不仅能观察无色透明的物体,而且图象呈现出浮雕状的立体感,并具有相差观察所不能达到的某些优点,观察效果更为逼真。

主要应用于无色透明活体标本的细微结构,显微操作等。

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.霍夫曼观察HMC/NAMC(Hoffman Modulation Contrast)

利用斜射光照射,将相位梯度转换为光强度变化,可以用来观察未经染色的样品和活细胞,样品有浮雕感。

可应用于细胞,组织(无论活体,染色,未染色),晶体表面细节,透明聚合物,玻璃和其它类似材料,尤其适用于显微操作。

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.偏光观察POL(Polarizing microscope )

偏光观察可以检测双折射物质,凡具有双折射的物质(双折射性是晶体的基本特性),在偏光显微镜下就能分辨的清楚。

主要应用于矿物,化学物品鉴别、纤维、淀粉粒、细胞中晶体鉴别。也可用于病理检验,如刚果红染色鉴别淀粉样物质沉着,痛风等检验。

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七.暗场观察DF(Darkfield )
暗场观察实际是暗场照明。聚光器中内有挡光片,使照明光线不直接进入物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用暗场观察能见到小至0.2—0.004um的微粒子。

主要应用于微小粒子、原虫、细菌的鞭毛、伪足运动,医学检验学范围适用于观察人体体液中螺旋体、尿管形、结晶或各种粒子等。

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 总 结

一.明场观察―――常规染色片  <正置、倒置、体视显微镜>

二.相差观察―――活细胞和未染色标本 <正置、倒置显微镜>

三.荧光观察―――物质鉴定(抗体、抗原、原位杂交FISH等)<正置、倒置、体视显微镜>

四. DIC观察―――活细胞和未染色标本 <正置、倒置显微镜>

五.霍夫曼观察―――活细胞,尤其适用于显微操作 <倒置显微镜>

六.偏光观察―――双折射物质(晶体检测)<正置、体视显微镜>

七.暗场观察―――微粒外观 <正置、倒置、体视显微镜>.

 


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